組成部分：細(xì)胞 T25瓶 細(xì)胞數(shù)量1-3百萬級(jí)別+說明書
組織來源：皮膚
形態(tài)特征：成纖維樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基：90% DMEM培養(yǎng)基+10% 特級(jí)胎牛血清
氣相：空氣95%，二氧化碳5%
溫度：37℃
TE353.sk細(xì)胞，人正常皮膚細(xì)胞 操作步驟：
1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無菌操作臺(tái)，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代;
2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底面積80%-90%，需要對(duì)其進(jìn)行傳代，第一次傳代比例為1:2。
3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶，置于37°孵育消化(第一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為消化時(shí)間，記錄消化時(shí)間，以便于下次消化)，消化好后加入1ml培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。
注意事項(xiàng)：
1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用，請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對(duì)于貼壁細(xì)胞，若大部分細(xì)胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁，表明細(xì)胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁，將漂浮的細(xì)胞離心收集，用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力，并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。
4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請(qǐng)于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問題，超過時(shí)間我段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好，不免費(fèi)對(duì)后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。
5 因細(xì)胞產(chǎn)品的特殊性，如客戶對(duì)本公司細(xì)胞質(zhì)量存有疑問，請(qǐng)于收到細(xì)胞后兩個(gè)月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，超過時(shí)間段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞質(zhì)量?jī)?yōu)良，不承擔(dān)因細(xì)胞產(chǎn)生的任何責(zé)任。
